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        磷酸化多肽單抗

        服務編號:YKMS-003          

        服務標準:
            1.1-3株雜交瘤細胞株
            2.每株細胞提供2-5 mg抗體
            3.磷酸化多肽抗體ELISA效價大于80,000
            4.磷酸化多肽與非磷酸化多肽效價區分大于16倍(ELISA、Dot Blot)

        服務內容:
            1.多肽合成(磷酸化多肽10 mg,>85%;非磷酸化多肽10 mg,>85%)
            2.多肽偶聯(KLH用于免疫,BSA用于檢測)
            3.免疫6只 Bal b/c小鼠,每只小鼠4-5次免疫,小鼠血清Elisa效價達到1:10000以上
            4.取血清效價最高的小鼠的脾細胞與SP2/0進行細胞融合
            5.3-4次亞克隆后得到穩定分泌特異性抗體的雜交瘤細胞株
            6.雜交瘤細胞株擴增/凍存
            7.小鼠腹水制備,Protein G純化得到抗體 
            8.抗體Elisa檢測效價,亞型鑒定

        最終交付的材料:
            1.1-3株雜交瘤細胞株
            2.每株細胞提供2-5mg Protein G純化的抗體
            3.磷酸化與非磷酸化多肽各1mg
            4. Elisa數據報告,亞型鑒定報告,完整項目報告

        Phosphor-peptide  → Monoclonal antibody 

        Service Including:

              a.Peptide antigen design and preparation:

                 Peptide synthesis of up to 18 AA residues (20-30 mg) with a purity > 85%

              b.Peptide conjugation:

                Peptide conjugation to KLH and BSA

              c.Immunization and serum titer test:

                 Pre-immune bleed

                 Six Balb/c mice immunization

                 Serum titer test

              d.Fusion and Screening:

                 Fusion and Screening

                 Subcloning and cell expansion

              e.Antibody production & purification:

                 Appropriate scale hybridoma cell culture

                 Purified by protein A affinity chromatography

        Customer to provide:

               Peptide Sequence

        Delivery:

              a.1-3 hybridoma cell lines; 

              b.2-5 mg protein A purified mAb per cell line. 

              c.mAb specific to phosphor-peptide: ELISA titer ≥80,000

              d. mAb titer to phosphor-peptide/non-phosphor-peptide ≥16 (ELISA and Dot Blot)

        Time:

              20-26 weeks

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